Как вылечить кролика больное ухо
Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционной иммунологии. Способ предусматривает использование для сенсибилизации твердой фазы противогриппозной вакцины, при том что визуализацию сформировавшихся в ходе инкубации сенсибилизированной поверхности иммуносорбента с тестируемой сывороткой, содержащей антитела к вирусу гриппа, комплексов антиген-антитело проводят при помощи оптически контрастного конъюгата G белок-углерод в течение 10-15 минут. Технический результат: создание простой, высокочувствительной, оперативной, наглядной и надежной диагностической системы для оценки напряженности поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа. 1 пр., 1 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционной иммунологии, и касается разработки иммунологической видоспецифической системы для оценки сероконверсии в ответ на иммунизацию в ходе вакцинопрофилактики гриппа на основе безинструментального определения уровня антител.
Ежегодно в РФ проводится профилактическая иммунизация населения, направленная на предупреждение, ограничение распространения и ликвидацию инфекционных болезней. Законодательством регламентирована вакцинация населения в рамках национального календаря прививок, а также по эпидемическим показателям. Для оценки эффективности профилактических мер осуществляют мониторинг напряженности поствакцинального иммунитета, основанный на измерении содержания антител в сыворотке крови испытуемых.
Одним из наиболее социально значимых заболеваний в РФ является грипп. Ежегодно в течение первого полугодия происходит сезонный подъем заболеваемости гриппом, в период которого количество больных достигает в определенных регионах 70-100 человек на 10000 населения. Профилактические мероприятия ежегодно затрагивают более 30 млн человек, из которых примерно половину составляют дети. При этом статистика свидетельствует о том, что процент заболеваемости среди привитых пациентов весьма высок и достигает 35-40%. Система тотального мониторинга эффективности вакцинации в системе противоэпидемических мер отсутствует. В качестве причины чаще всего называют отсутствие аналитических инструментов (тест-систем), пригодных для быстрого, эффективного, упрощенного тестирования.
Высокая продолжительность эпидемического подъема заболевания (в среднем по РФ 4-6 недель), масштаб его негативного влияния на социально-экономическую сферу обуславливают необходимость совершенствования методов серологической диагностики, которые позволили бы более оперативно, и в то же время с высокой степенью надежности, производить мониторинг состояния противогриппозного иммунитета среди населения в условиях напряженной эпидемической ситуации.
Основным и наиболее близким по технической сущности к разработанному способу является метод серологического анализа гриппа при помощи сухого гриппозного диагностикума, используемого в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) (Рег. номер 94/161/330 ФС 42-310 ВС-90, утв. приказом Минздравмедпрома РФ от 10.08.1994 №161).
Сущность способа-прототипа заключается в следующем.
Диагностикум представляет собой лиофильно высушенные штаммы вируса гриппа. Реакция основывается на способности иммунной сыворотки ингибировать инициированную вирусом агглютинацию эритроцитов кур.
Реакцию проводят в U-образных лунках полистирольного планшета. Готовят серию двукратных разведений исследуемого образца, к каждому разведению добавляют диагностикум. Инкубацию проводят в течение часа при температуре 25°C. После этого в лунки вносят 1% суспензию эритроцитов, предварительно трехкратно отмытых физиологическим раствором и центрифугированием. При наличии в сыворотке антител к вирусу гриппа агглютинации эритроцитов не наблюдается.
Основными недостатками описанного метода является:
— необходимость наличия и предварительной подготовки эритроцитов кур;
— необходимость длительной подготовки пробы и диагностикума перед процедурой анализа (титрование раствора антигена, истощение пробы в отношении неспецифических индукторов агглютинации);
— нестабильность при хранении эритроцитарного диагностикума;
— невозможность сохранения (документирования) результатов анализа;
— потребность в постановке дополнительных контрольных опытов, демонстрирующих отсутствие неспецифической агглютинации.
Предлагаемое изобретение решает задачу по созданию более простой, высокочувствительной, оперативной, наглядной и надежной диагностической системы для оценки напряженности поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа.
Решение задачи осуществляется благодаря тому, что процедурный формат тест-системы носит безинструментальный характер и предусматривает использование для сенсибилизации твердой фазы противогриппозной вакцины, при том что визуализация сформировавшихся в ходе инкубации сенсибилизированной поверхности иммуносорбента с тестируемой сывороткой, содержащей антитела к вирусу гриппа, комплексов антиген-антитело проводят при помощи оптически контрастного конъюгата G белок-углерод в течение 10-15 минут.
Новизна разработанного способа заключается в использовании противогриппозной вакцины в качестве сенситина. Идентичность антигенов, используемых в вакцине и применяемых для сенсибилизации твердой фазы, обеспечивает высокую чувствительность и специфичность разработанной системы. Высокие показатели чувствительности, позволяющие определять наличие антител в разведении сыворотки 1/51200, делают возможным использование разработанного способа не только для анализа поствакцинального иммунитета, но и для качественной характеристики вакцин, выпускаемых различными производителями.
Описание разработанного способа. В качестве твердой фазы используется мембрана из нитроцеллюлозы с диаметром пор 0,45 мкм (Bio-Rad, США).
На диски из нитроцеллюлозной мембраны диаметром 5 мм наносили сенситин (вакцину) по 5 мкл в забуференном фосфатами физиологическом растворе с азидом натрия (ЗФР). В качестве внутреннего отрицательного контроля сорбировали бычий сывороточный альбумин (БСА) в концентрации 0,1 мг/мл.
После подсушивания мембраны и инкубации (5 мин) в блокирующем растворе, в качестве которого использовали забуференный фосфатами физиологический раствор, содержащий 0,05% твина-20 (ЗФРТ), мембраны помещали в лунки планшета, заполненные сыворотками вакцинированных пациентов с серийным разведением, кратным двум, начиная с разведения 1:50 на 30 минут. После чего мембраны промывали ЗФРТ и осуществляли детекцию конъюгатом G белок-углерод в течение 10-15 минут. Конъюгат G белок-углерод готовили по оригинальному способу (Раев М.Б. Частицы коллоидного углерода в качестве меток диагностических реагентов // Вестник уральской медицинской академической науки. 2006. №3(1). С.202-205). В качестве источника частиц углерода использовали аморфный углерод, который получали в виде сажи путем конденсирования из пламени горящего толуола на стеклянной поверхности с последующей тщательной промывкой и высушиванием.
В процессе получения суспензии углеродных частиц к 2-х процентному раствору белка G в ЗФР добавляли аморфный углерод до конечной концентрации 5% в условиях вихревого перемешивания на магнитной мешалке. Полученную суспензию озвучивали в ультразвуковом дезинтеграторе, центрифугировали, активировали при помощи глутарового альдегида в присутствии G белка. Процесс конъюгирования проводили в течение 1 часа 40 минут при комнатной температуре и интенсивном перемешивании, после чего реагент центрифугировали при 6000 g и освобождали от избытка глутарового альдегида и несвязавшегося анти-лиганда гель-фильтрацией на колонке с Сефарозой CL-6B. Полученный конъюгат использовали для детекции в системах анализа.
Пример
На диски из нитроцеллюлозной мембраны диаметром 5 мм наносили сенситин (вакцину противогриппозную «Ваксигрипп», разведенную в ЗФР 1:16) по 5 мкл. В качестве внутреннего отрицательного контроля сорбировали бычий сывороточный альбумин (БСА) в концентрации 0,1 мг/мл.
После подсушивания мембраны и инкубации (5 мин) в блокирующем растворе, в качестве которого использовали забуференный фосфатами физиологический раствор, содержащий 0,05% твина-20 (ЗФРТ), мембраны помещали в лунки планшета, заполненные сывороткой вакцинированных с серийным разведением, кратным двум, начиная с разведения 1:50. Тестированию подвергали по четыре сыворотки от каждого пациента: взятые в день вакцинации, спустя 3, 4 и 5 недель после нее. В качестве внешнего положительного контроля использовали сыворотку здорового кролика в аналогичных разведениях в том же буфере. После этого мембраны промывали ЗФРТ и осуществляли детекцию конъюгатом G белок-углерод в течение 10-15 минут.
Результаты представлены на рисунке 1. Чувствительность сконструированной системы превышает на 2 порядка чувствительность РТГА — стандартного метода серологической диагностики гриппа, длительность аналитической процедуры не превышает 45 минут, результаты исследования можно хранить бесконечно долго и использовать при необходимости мониторинга качественных показателей иммуногенности вакцин и иммунореактивности вакцинируемых пациентов.
Каждый ряд дисков на рис.1 соответствует одной исследованной сыворотке, в верхней части рисунка указаны их разведения, на все диски нанесена вакцина в разведении 1:16. 0, 3, 4, 5 — сыворотки пациента, полученные соответственно в день вакцинации, спустя 3, 4 и пять недель после нее; Кр — сыворотка здорового кролика; ОК — внутренний отрицательный контроль — диск с нанесенным БСА в концентрации 0,1 мг/мл, инкубированный с сывороткой пациента, полученной в день вакцинации. Стрелками обозначены последние визуализированные точки в рядах серийных разведений.
На рисунке видно, что с помощью разработанной системы были выявлены восьмикратный прирост титра антител в сыворотке крови пациента спустя 3 недели после вакцинации и его сохранение в течение последующих двух недель. Максимальное разведение сыворотки, в котором были обнаружены антитела против вируса гриппа, составило 1:51200, что на 2 порядка выше, чем в стандартном методе анализа (РТГА).
Таким образом, разработанный метод позволяет усовершенствовать оценку состояния поствакцинального противогриппозного иммунитета, упростить ее на фоне существенного повышения чувствительности тестирования, создав условия для возможности тотальной оценки эффективности профилактических мер. Важнейшими составляющими результатов внедрения разработанного способа является возможность своевременного внесения коррекции в процесс вакцинации и/или оценить качество вакцинного препарата.
Таким образом, предложенный способ позволяет существенно улучшить и сократить по времени оценку напряженности иммунитета в ответ на вакцинацию, за счет высокой чувствительности системы определения специфических антител в сыворотке: 1:51200, и увеличить специфичность оценки за счет использования в качестве сенситина противогриппозной вакцины.
Технический результат от использования изобретения заключается в повышении диагностической эффективности при сохранении высокой чувствительности и видоспецифичности способа, сокращении времени на проведение исследования, неинструментальной визуализации результатов исследования и возможности сохранения (документирования) результата исследования в течение длительного времени.
Заявляемое техническое решение соответствует критерию «промышленное применение», так как применяемые реагенты доступны, а исследования легко выполняемы.
Способ безынструментальной оценки напряженности поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа путем прямой визуализации связанных сенситином антител к вирусу гриппа, отличающийся тем, что в качестве сенситина, сенсибилизирующего поверхность твердой фазы, используют противогриппозную вакцину, а для визуализации образующегося иммунного комплекса используют конъюгат белок G-углерод в течение 10-15 минут.
Источник
О влиянии вакцинопрофилактики на уровень заболеваемости гриппом и ОРВИ
Р.М. Хаитов1, А.В. Некрасов1, И.Н. Лыткина2, А.С. Иванова1, Б.В. Пинегин1
1 — ГНЦ РФ — Институт иммунологии МЗ РФ, г. Москва;
2 — Центр санэпиднадзора Москвы
В структуре инфекционной патологии острые респираторные заболевания, в том числе и грипп, занимают приоритетное направление как по количеству заболевших, так и по экономическому ущербу, наносимому данными инфекциями. Только в 2000 г. экономические потери от инфекций комплекса ОРВИ в г. Москве составили 2,9 млрд рублей.
Ежегодно в столице регистрируется от 2 600 000 до 2 800 000 больных гриппом и острыми респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ).
Изучение напряженности иммунитета к вирусам гриппа среди населения г. Москвы, проведенное во II и III кв. 2000 года (исследовано более 1600 сывороток крови), показало, что 43,6 % москвичей имели защитные титры антител к вирусу гриппа А (Н3N2), 40,4 % — к вирусу гриппа В и только 9,7 % — к вирусу гриппа А (Н1N1).
Вакцинопрофилактика с помощью современных инактивированных вакцин является эффективной мерой в борьбе с гриппом. Лица, входящие в группы риска, нуждаются в эффективных и высокобезопасных вакцинах. Однако для профилактики ОРВИ оптимальным считается комплексное использование средств специфической и неспецифической защиты.
В последние годы в практике здравоохранения появились новые инактивированные расщепленные и субъединичные вакцины производства зарубежных фирм: Ваксигрип (Франция), Бегривак (Германия), Флюарикс (Бельгия), Инфлювак (Голландия), а также отечественная субъединичная вакцина Гриппол. По данным зарубежных и отечественных авторов эти вакцины не столь значительно различаются по иммуногенным свойствам, все они отвечают требованиям Европейской Фармакопеи (уровень защиты более 70 %) и являются эффективными препаратами для профилактики гриппа (индекс эффективности колеблется в пределах 2,2-4,4) [3, 5].
В исследованиях зарубежных авторов было показано, что у вакцинированных против гриппа наблюдается 25%-ое снижение частоты ОРВИ, уменьшение длительности нетрудоспособности по причине ОРВИ на 43 % и обращений к врачу по поводу ОРВИ на 44 % [6].
Исследования по изучению заболеваемости ОРВИ у привитых вакциной Гриппол и непрививавшихся школьников в течение 5 месяцев после вакцинации [4] показали, что в группе привитых заболевания верхних дыхательных путей негриппозной этиологии регистрировали в 2,4 раза реже (рСходные результаты по снижению частоты ОРВИ у привитых вакциной Гриппол получили и другие исследователи. Так в работе Н.Н. Иващенко с соавт. (2000 г.) был проведен анализ заболеваемости у 39 442 человек г. Когалыма, из которых 6787 были привиты вакциной Гриппол. По результатам авторов, вакцинация привела к значительному (в 11 раз) снижению заболеваемости гриппом и ОРВИ.
С целью уточнения механизма действия Гриппола на снижение заболеваемости верхних дыхательных путей нами были проведены широкие иммунологические исследования вакцинированных взрослых до, через 8 дней и 1 месяц после вакцинации (Пинегин Б.В., Хаитов Р.М., Некрасов А.В. и др., 2000 г.). Показано, что в период формирования специфического иммунитета под влиянием вакцины Гриппол не только не наблюдается чрезмерного перенапряжения иммунной системы и она адекватно отвечает на нагрузку, но и имеет место ее коррекция. То есть вакцинация Грипполом повышает сниженные показатели иммунитета и приводит их к норме в случае высокой реактивности иммунной системы до вакцинации. Нормализующий эффект вакцины Гриппол на Т-хелперы и иммунную систему в целом, по-видимому, в большей степени обусловлен наличием в ее составе иммуномодулятора Полиоксидония.
Приведенные данные по отечественной вакцине Гриппол свидетельствуют о высоком уровне ее профилактической эффективности и безопасности и о возможностях неспецифической защиты организма от инфекции. Способность вакцины Гриппол повышать неспецифическую резистентность организма дает основания для применения данной вакцины вплоть до эпидемического подъема заболеваемости гриппом.
В результате прививок населения современными вакцинами и использования иммуномодуляторов в качестве средств неспецифической профилактики в эпидсезон 2000-2001 гг. в Москве зарегистрированы практически самые низкие за последние 15 лет наблюдений уровни заболеваемости гриппом и ОРВИ. Максимальные показатели заболеваемости (914,1 на 100 тыс. населения) отмечались в последнюю неделю декабря 2000 г. и были на 30,6 % ниже эпидемического порога.
Таким образом, использование современных гриппозных вакцин как с целью индивидуальной профилактики гриппа, так и при массовом их применении позволяет значительно снижать распространение этой инфекции, резко сокращать число тяжелых осложнений, смертность от этой инфекции, а также уменьшать заболеваемость гриппом и ОРВИ.
Литература
© Р.М. Хаитов, А.В. Некрасов, И.Н. Лыткина, А.С. Иванова, Б.В. Пинегин, 2001
Источник
Изобретение относится к области ветеринарии. Способ включает обогрев эмбрионов кур перед инкубацией светом газоразрядной лампы ДНЕСГ-500 длиной волны 630-650 нм, средней дозой на поверхности яиц 23,1 эрг в экспозиции 5 минут, облучение гелий-неоновым лазером ЛГН-104 длиной волны 632,8 нм, плотностью мощности оптического потока на поверхности яиц 50 мВт/см2, ртутно-кварцевой лампой ДРТ-400 длиной волны 400/185 нм, средней дозой на поверхности яиц 20 мэр/ч в экспозициях по 3 минуты. Затем выведенных цыплят иммунизируют вакциной из штамма «Бор-74 ВГНКИ». Светообработку эмбрионов в том же режиме и иммунизацию птицы сочетают с дезинфекцией яиц со всех сторон двумя бактерицидными лампами БУВ-15 длиной волны 254/800 нм, номинальной мощностью на поверхности яиц 15 Вт и тремя бактерицидными лампами БУВ-30 длиной волны 254/800 нм, номинальной мощностью 30 Вт в экспозициях по 3 мин. А светообработку птицы в том же режиме проводят перед инкубацией на 6, 12, 18 дни развития зародышей и выведенных суточных цыплят. Способ повышает выживаемость бройлеров, выращиваемых в неблагополучных по болезни Ньюкасла производственных условиях. 3 табл.
Изобретение относится к птицеводству и может быть использовано для повышения специфической устойчивости птицы к болезни Ньюкасла.
Известен способ повышения напряженности иммунитета к болезни Ньюкасла посредством вакцинации птицы из штамма «Бор-74 ВГНКИ» аэрозольным методом из расчета 300-400 ЗИД 50 иммунизирующих доз вируса (Временное наставление по применению сухой вирусвакцинации ньюкаслской болезни птиц из штамма «Бор-74 ВГНКИ», МСХ СССР, Главное управление ветеринарии. Утверждено А.Д.Третьяковым 11 июля 1980 г.).
Недостатком известного способа является то, что это влияет на материнский иммунитет и не обеспечивает высокого иммунного фона у привитой птицы.
Известен способ повышения устойчивости птицы к болезни Ньюкасла, при котором в целях повышения напряженности иммунитета к ньюкаслской болезни проводится прединкубационная обработка эмбрионов кур светом гелий-неонового лазера ЛГН-104 длиной волны 632,8 нм, плотностью мощности оптического потока на поверхности яиц 50 м Вт/см2, газоразрядной лампы ДНЕСГ-500 длиной волны 630-650 нм, средней дозой на поверхности яиц 23,1 эрг и ртутно-кварцевой лампы ДРТ-400 длиной волны 400/185 нм, средней дозой на поверхности яиц 20 мэр/ч в экспозициях по 3 минуты (Мамукаев М.Н. Патент на изобретение №2129030, ФИПС, Москва, 20 апреля 1999 г., прототип).
Недостатком известного способа является то, что не используются все резервы организма для повышения напряженности иммунитета и не обеспечивается максимальная сохранность птицы от болезни Ньюкасла.
Целью изобретения — повышение специфической устойчивости птицы к болезни Ньюкасла.
Эта цель достигается тем, что инкубационные яйца перед инкубацией, на 6, 12, 18 дни развития эмбрионов и выведенные суточные цыплята единовременно обогреваются светом газоразрядной лампы ДНЕСГ-500 длиной волны 630-650 нм, средней дозой на поверхности яиц 23,1 эрг и дезинфицируются со всех сторон тремя бактерицидными лампами БУВ-30 длиной волны 254/800 нм, номинальной мощностью на поверхности яиц 30 Вт в экспозициях по 3 минуты, облучаются гелий-неоновым лазером ЛГН 104-длиной волны 632,8 нм, плотностью мощности оптического потока на поверхности яиц 50 мВт/см2, ртутно-кварцевой лампой ДРТ-400 длиной волны 400/185 нм, средней дозой на поверхности яиц 20 мэр/ч и двумя бактерицидными лампами БУВ-15 длиной волны 254/800 нм, номинальной мощностью на поверхности яиц 15 Вт, а выведенные суточные цыплята иммунизируются вакциной из штамма «Бор-74 ВГНКИ» аэрозольным методом.
Напряженность иммунитета к болезни Ньюкасла определяли с помощью реакции задержки гемагглютинации (РЗГ).
Установлено что у суточных и месячных цыплят-бройлеров обработка эмбрионов перед инкубацией, развивающихся зародышей на 6, 12, 18 дни и выведенных суточных цыплят лучистой энергией в узком участке спектра и комплексное воздействие вызывают значительные сдвиги напряженности иммунитета и выживаемости птицы, выращиваемой в зоне неблагополучного птицехозяйства по болезни Ньюкасла (табл. 1, 2)
У суточных цыплят, полученных из яиц, обработанных газоразрядной лампой ДНЕСГ-500 и ртутно-кварцевой лампой ДРТ-400 (3, 4 группы) более высокие показатели напряженности материнского иммунитета по сравнению с контролем носят недостоверный характер (Р>0,05), в то время как обработка яиц излучением гелий-неонового лазера ЛГН-104 (2 группа) и комплексное воздействие перед инкубацией лампами ДНЕСГ-500, ДРТ-400 и лазером ЛГН-104 (5 группа), облучение и дезинфекция эмбрионов лампами ДНЕСГ-500, ДРТ-400, БУВ-30, лазером ЛГН-104 перед инкубацией (6 группа), перед инкубацией, на 6, 12 и 18 дни развития зародышей (7 группа) и перед инкубацией, на 6, 12, 18 дни эмбриогенеза и выведенных суточных цыплят (8 группа), наблюдается стабильное повышение напряженности иммунитета и выживаемости птицы от болезни Ньюкасла в неблагополучных производственных условия.
В контрольной группе бройлеров наиболее высокие показатели РЗГ наблюдалось при титрах разведения 1:8-1:32 и составили 71,26%; соответственно в группе воздействия гелий-неоновым лазером: 1:16-1:64; 76,92%, газоразрядной лампой: 1:8-1:32; 71,98%, ртутно-кварцевой лампой: 1:8-1:32; 69,34; лазером ЛГН-104, лампами ДНЕСГ-500 и ДРТ-400 перед инкубацией: 1:16-1:64; 69,56%.
Наиболее высокие результаты напряженности материнского иммунитета к болезни Ньюкасла, наблюдаются в 7 и 8 опытных группах, где пик напряженности иммунитета составляют титры разведения гемагглютининов 1:64, то есть 18,0 и 21,5% и 1:128 — 35,5 и 38,4% соответственно. Результаты достоверны при Р<0,001.
В контрольной группе бройлеров наиболее высокие показатели РЗГ наблюдалось при титрах разведения 1:8-1:32 и составили 71,26%; соответственно в группе воздействия гелий-неоновым лазером: 1:16-1:64; 76,92%, газоразрядной лампой: 1:8-1:32; 71,98%, ртутно-кварцевой лампой: 1:8-1:32; 69,34%; лазером ЛГН-104, лампами ДНЕСГ-500 и ДРТ-400 перед инкубацией: 1:16-1:64; 69,56%.
Установлено, что у месячных цыплят-бройлеров обработка эмбрионов перед инкубацией развивающихся зародышей на 6, 12, 18 дни выведенных суточных цыплят лучистой энергией в узком участке спектра и комплексном воздействии вызывают значительные сдвиги напряженности иммунитета и выживаемости птицы, выращиваемой в зоне неблагополучного птицехозяйства по болезни Ньюкасла (табл.1; 2). ДРТ-400 перед инкубацией: 1:16-1:64; 69, 56%.
Результаты исследований напряженности иммунитета к болезни Ньюкасла: у привитой вакциной из штамма «Бор-74 ВГНКИ» птицы к месячному возрасту пик напряженности иммунитета составляет титр разведения гемагглютиников 1:64, во 2, 3, 4 и 5 группах — 1:128, в 6, 7, и 8 группах — 1:256.
В контрольной группе 64,64% птицы реагируют при титрах разведения гемагглютиников 1:32-1:128, во 2-5 группах титры разведения 1:64-1:256 составлял 60-72%, в 6 группе титры разведения 1:64-256 были равны 69,02%, в 7 и 8 группах титры разведения 1:128-1:512 составили 69,28 и 70,96% соответственно.
Различия показателей РЗГ между 1 и 2 группами достоверны при титрах разведения гемагглютиников 1:4-1:64 в суточном возрасте и 1:16-1:256 — в месячном возрасте бройлеров, 1 и 3, 1 и 4 группами достоверных различий не было, 1 и 5, 1 и 6 группами достоверны различия при титрах 1:4-1:128 в суточном возрасте и 1:16-1:512 в месячном возрасте. Аналогичные показатели составили в 7 группе: 1:4-1:16; 1:128-1:256 — у 1-дневных и 1:16-1:32; 1:256-1:512 — у 30-дневных, 8 группе: 1:4-1:256 — у 1-дневных и 1:16-64; 1:256-1:516 — у 30-дневных цыплят-бройлеров.
Результаты исследования концентрации гемаглютинников в сыворотке крови месячных бройлеров при титрах разведения 1:2048-1:4096 свидетельствуют о том, что выживаемость птицы, контактируемой с вирусом болезни Ньюкасла в полевых (производственных) условиях составляет в контрольной группе 2,68%, при применении гелий-неонового лазера — 5,26%, газоразрядной лампы — 2,79%, ртутно- кварцевой лампы — 4,66%, при комплексной прединкубационной обработке лазером ЛГН-104, лампами ДНЕСГ-500 и ДРТ-400 — 6%, при прединкубационной обработке светом лазера ЛГН-104, ламп ДНЕСГ-500 и ДРТ-400 и дезинфекции яиц лампами БУВ-30 и БУВ-15-7,7%, комплексной обработке лазером ЛГН-104, лампами ДНЕСГ-500, ДРТ-400 и дезинфекции яиц перед инкубацией, на 6, 12 и 18 дни развития эмбрионов — 8,3% и при комплексной обработке лазером ЛГН-104, лампами ДНЕСГ-500, ДРТ-400 и дезинфекции яиц и развивающихся зародышей лампами БУВ-30 и БУВ-15 перед инкубацией, на 6, 12, 18 дни инкубации и выведенных суточных цыплят — 10,84%.
Результаты специфической устойчивости птицы к болезни Ньюкасла при лучистых воздействиях положительно коррелируют с показателями общей резистентности и сохранности цыплят-бройлеров (табл.3)
| Таблица 1 Динамика напряженности иммунитета к болезни Ньюкасла у суточных бройлеров при лучистых воздействиях, п=50 | ||||||||
| Титры разведения аглютиков | группа | |||||||
| 1 — контрольн | 2 — опытная | 3 — опытная | 4 — опытная | 5 — опытная | 6 — опытная | 7 — опытная | 8 — опытная | |
| источник лучистой энергии и время обработки | ||||||||
| — | ЛГН-104: перед инкубац. | ДНЕСГ-500: перед инкубацией | ДРТ-400: перед инкубацией | ЛГН; ДНЕСГ; ДРТ: перед инкубацией | ЛГН; ДНЕСГ; ДРТ; БУВ-15; БУВ-30: перед инкубацией (1) | ЛГН; ДНЕСГ; БУВ-15; БУВ-30: перед инкубац., на 6, 12 и 18 дни развития | ЛГН; ДНЕСГ; ДРТ; БУВ-15; БУВ-30: перед инкубацией, на 6, 12, 18 дни развития и суточ. цыплят | |
| 1:2 | 0,44±0,48 | 0,13±0,31 | 0,22±0,39 | 0,22±0,63 | ||||
| 1:4 | 2,89±0,79 | 1,56±1,13 | 2,78±1,09 | 2,22±1,15 | 0,33±0,64 | 0,22±0,95 | 0,17±0,43 | 0,10±0,54 |
| 1:8 | 10,56±1,75 | 4,33±1,68 | 9,44±0,81 | 8,33±2,24 | 4,00±1,70 | 2,81±1,12 | 2,94±0,94 | 1,92±0,85 |
| 1:16 | 15,07±1,58 | 10,57±1,01 | 15,33±1,54 | 12,56±2,41 | 8,78±1,98 | 7,22±1,32 | 6,01±1,16 | 5,54±1,23 |
| 1:32 | 10,00±1,50 | 14,89±1,09 | 11,22±2,22 | 13,78±2,11 | 10,78±2,44 | 7,79±1,48 | 8,24±1,73 | 6±17,1,59 |
| 1:64 | 4,33±1,52 | 13,00±1,00 | 5,89±1,54 | 8,11±2,06 | 15,22±2,33 | 10,11±1,54 | 9,38±1,33 | |
| 1:128 | 1,56±0,77 | 3,14±1,34 | 3,11±1,45 | 3,67±1,49 | 7,11±1,45 | 15,88±1,69 | 17,74±1,92 | 19,22±1,1,88 |
| 1:256 | 0,44±0,95 | 1,89±0,87 | 1,68±1,13 | 2,00±1,33 | 3,11±1,62 | 5,97±1,76 | 5,52±1,17 | 6,3±1,33 |
| 1:512 | ||||||||
| 1:1024 | ||||||||
| 1:2048 | ||||||||
| 1:4096 |
| Таблица 2 Динамика напряженности иммунитета месячных бройлеров к болезни Ньюкасла при лучистых воздействиях, п=50 | ||||||||
| Титры разведения аглютиков | группа | |||||||
| 1 — контрольная | 2 — опытная | 3 — опытная | 4 — опытная | 5 — опытная | 6 — опытная | 7 — опытная | 8 — опытная | |
| источник лучистой энергии и время обработки | ||||||||
| 1:2 | ||||||||
| 1:4 | ||||||||
| 1:8 | 1,76±1,46 | 0,67±0,91 | ||||||
| 1:16 | 8,87±1,37 | 2,00±1,17 | 3,78±1,98 | 2,33±1,32 | 1,22±0,67 | 0,85±1,64 | 0,54±1,82 | 0,4±0,54 |
| 1:32 | 10,00±0,98 | 5,78±0,83 | 7,89±1,51 | 7,11±1,76 | 3,78±1,09 | 2,37±1,85 | 1,73±1,64 | 0,86±0,32 |
| 1:64 | 11,99±1,03 | 8,89±1,14 | 10,67±1,32 | 11,67±2,18 | 3,67±1,66 | 6,23±1,73 | 5,19±2,13 | 4,00±1,05 |
| 1:128 | 10,33±1,19 | 15,44±1,25 | 11,67±1,09 | 12,56±1,59 | 16,11±2,37 | 13,88±1,28 | 11,08±1,38 | 9,17±0,95 |
| 1:256 | 3,89±1,72 | 10,67±1,91 | 7,67±1,17 | 9,33±1,00 | 11,33±1,00 | 14,43±1,26 | 16,12±1,73 | 17,75±1,22 |
| 1:512 | 1,22±0,70 | 2,22±0,58 | 2,78±1,14 | 3,33±1,32 | 4,00±1,00 | 6,20±1,62 | 7,44±1,66 | 8,56±0,81 |
| 1:1024 | 0,67±0,51 | 1,89±0,43 | 1,22±0,84 | 1,78±0,88 | 2,44±0,94 | 3,00±1,30 | 3,75±1,17 | 3,84±1,17 |
| 1:2048 | 0,56±0,69 | 1,30±0,60 | 1,00±0,63 | 1,4±0,68 | 1,67±0,70 | 2,06±1,16 | 2,00±0,54 | 2,93±0,43 |
| 1:4096 | 0,78±0,64 | 1,33±0,51 | 0,67±0,72 | 0,89±0,73 | 1,33±0,78 | 1,79±0,79 | 22,15±0,61 | 2,49±0,58 |
| Таблица 3 Динамика жизнеспособности цыплят-бройлеров при лучистых воздействиях | |||||
| Группа | Возраст птицы, дней | ||||
| 1 | 15 | 30 | 45 | 56 (конец выращивания) | |
| 1 — контр. | 5149 | 4948 | 4804 | 4639 | 4538-88,13% |
| 2 — опыт. | 5529 | 5432 | 5257 | 5201 | 5191-93,89 |
| 3 -\-\-\-\- | 5427 | 5329 | 5141 | 5047 | 4976-91,69 |
| 4 -\-\-\-\- | 5523 | 5445 | 5306 | 5251 | 5171-93,63 |
| 5 -\-\-\-\- | 5593 | 5533 | 5448 | 5409 | 5354-95,73 |
| 6 -\-\-\-\- | 5681 | 5617 | 5549 | 5472 | 5458-96,07 |
| 7 -\-\-\-\- | 5713 | 5648 | 5608 | 5574 | 5543-97,02 |
| 8 -\-\-\-\- | 5709 | 5680 | 5661 | 5638 | 5612-98,30 |
По сравнению с контролем более высокая сохранность бройлеров наблюдалось в группе применения комплексной светолазерной обработки и дезинфекции эмбрионов кур перед инкубацией, на 6, 12, 18 дни развития и выведенных цыплят, когда из 5709 суточных бройлеров до конца откорма (56 дней) сохранено 5612 голов, что составило 98,3%.
Таким образом, более высокие результаты напряженности иммунитета к болезни Ньюкасла и жизнеспособности зарегистрированы в группе облучения инкубационных яиц, развивающихся зародышей на 6, 12, 18 дни и суточных цыплят светом гелий-неонового лазера ЛГН-104, газоразрядной лампой ДНЕСГ-500, ртутно-кварцевой лампой ДРТ-400 и дезинфекции со всех сторон двумя бактерицидными лампами БУВ-15 и тремя БУВ-30. По отношению с контролем где наиболее высокие титры антител установлены при разведениях гемагглютиников 1:8-1:32 (71, 26%) в суточном возрасте, 1:32-1:128 (64, 64%) у месячных бройлеров, соответственно в опытной группе: 1:64-1:512 (72,52%); 1:128-1:512 (70,96%).
Выживаемость птицы выращиваемых в неблагополучных по болезни Ньюкасла в условиях до месячного возраста в контроле составила 2,68%, в 8 опытной группе — 10,84%, общая жизнеспособность соответственно 88,13 и 98,30%.
Способ повышения напряженности иммунитета к болезни Ньюкасла, включающий обогрев эмбрионов кур перед инкубацией светом газоразрядной лампы ДНЕСГ-500 длиной волны 630-650 нм, средней дозой на поверхности яиц 23,1 эрг в экспозиции 5 мин, облучение гелий-неоновым лазером ЛГН-104 длиной волны 632,8 нм, плотностью мощности оптического потока на поверхности яиц 50 мВт/см2, ртутно-кварцевой лампой ДРТ-400 длиной волны 400/185 нм, средней дозой на поверхности яиц 20 мэр/ч в экспозициях по 3 мин, затем выведенных цыплят иммунизируют вакциной из штамма «Бор-74 ВГНКИ», отличающийся тем, что светообработку эмбрионов в том же режиме и иммунизацию птицы сочетают с дезинфекцией яиц со всех сторон двумя бактерицидными лампами БУВ-15 длиной волны 254/800 нм, номинальной мощностью на поверхности яиц 15 Вт и тремя бактерицидными лампами БУВ-30 длиной волны 254/800 нм, номинальной мощностью 30 Вт в экспозициях по 3 мин, а светообработку птицы в том же режиме проводят перед инкубацией на 6, 12,18 дни развития зародышей и выведенных суточных цыплят.
Источник
